产品目录

本试剂盒采用Berthelot反应检测血液中氨氮含量。可以用于血浆和血清样本检测，也可以用于体液、尿液等的氨氮含量检测。

体内各组织各种氨基酸分解代谢产生的氨以及由肠管吸收进来的氨进入血液，形成血氨。血氨在酸性与碱性环境中其存在形式发生NH3与NH4+的转变。血氨的主要来源是胃肠道产氨（尿素分解，食物蛋白分解），肠道细菌有尿激酶，可将尿素分解产生氨；肾脏产氨（谷氨酰胺分解产氨），血液中的谷氨酰胺流经肾脏时，可被肾小管上皮细胞中的谷氨酰胺酶分解成谷氨酸和氨，如果尿的pH值较高，氨易被重新吸收入血；骨骼肌，心肌代谢产氨：组织中的氨基酸经过联合脱氨作用脱氨或其他方式脱氨。

• 使用方便，不需要特殊仪器；
  
• 适用于普通分光光度计或酶标仪分析；
  
• 可用于血浆、血清、体液、尿液等样本。

• 以EDTA-Na2、EDTA-K2抗凝血为宜。
  
• 也可以用肝素钠抗凝血，因为肝素是一种酸性黏多糖，属于一种阴离子多聚电解质，和阳离子有不同的亲和力，与氨有聚合作用，使血液氨氮结果偏低。采用肝素抗凝血样本测定血液氨氮浓度，肝素浓度需控制在10～40U/mL以内为宜。
  
• 用去氨的抗凝管血液氨氮浓度明显低于未去氨的抗凝管。
  
• 采血至真空采血管负压应为零。红细胞氨氮浓度是血浆的2.8倍，故标本应禁止溶血，溶血可使红细胞内的氨进入血浆。红细胞和血小板中的γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）、谷丙转氨酶（ALT），可引起血液氨氮的浓度的自然增加。

• 收集标本后最好立即检测，放置时间不得超过一小时，最好30分钟内检测，2～8℃放置，不可冻存。随着标本放置时间的延长，血液氨氮值会不断的升高。
  
• 低温离心5分钟，取血浆迅速测定，30分钟内检测完成。
  
• 实在不方便立即检测的，收集好血浆样本后-80℃冻存。
  
• 最好采用无氨纯水，没有纯水条件时至少使用蒸馏水。
  
• 蛋白去除剂A和B不可以提前混合使用。
  
• 显色剂C和D不可以提前混合使用。
  
• 加入蛋白去除剂后不可长时间放置，要及时离心取上清检测。
  
• 上清可能呈淡黄色雾状，不需要处理，加入显色剂检测即可。

• 标准品工作液配制：
  根据样本数量，用标准品稀释液F按1∶19将7mM氨标准品进行20倍稀释，配制成350μM标准品工作液。
  
• 按下表加入各成分配制反应体系
  

  成分	空白对照管	标准管	样品管
  待测样本			0.2mL
  350μM标准品工作液		0.2mL
  标准品稀释液F	0.2mL
  试剂A：蛋白去除剂A	1mL
  试剂B：蛋白去除剂B	1mL
  充分混匀，3500转/分离心10min，取上清显色
  上清	1mL
  试剂C：显色剂C	1mL
  试剂D：显色剂D	1mL

  • 以上以分光光度计检测为例，仅供参考。实际使用时以样品数量情况和所使用的检测仪器进行调整。
• 充分混匀，37℃水浴20min，630nm检测，用纯水调零，测定各管吸光度。
  
• 计算公式：
  

  血液氨氮含量 (μM)	＝	OD样品－OD空白	×	标准浓度 (350μM)	×	样本测试前 稀释倍数
  		OD标准－OD空白

• 标准曲线绘制方法
  一般按上表直接测定计算即可，也可以先绘制标准曲线，然后检测，再查标准曲线进行计算。